IR spektroskopi kullanılarak in vitro meme kanser kök hücrelerinin araştırılması

Abstract

Amaç: Kanser kök hücreleri (KKH), tümör içinde kendi kendilerini yenileme ve diğer hücre tiplerinefarklılaşabilme kapasitesi sebebiyle tümörün başlaması, ilerlemesi, nüksetmesi, metastaz ve terapötikdirence yol açmaktadır. Bu nedenle, meme kanser kök hücrelerinin (MKKH) karakteristik özelliklerininbelirlenmesi gerekmektedir. Bu çalışmanın amacı, MKKH?lerin akış sitometrisi ile izole edildikten sonraFourier dönüşümlü kızılötesi (FTIR) spektroskopisi kullanarak hücre biyokimyasındakifarklılaşmalarının moleküler seviyede araştırılmasıdır.Gereç ve Yöntem: MCF-7 meme kanser hücre hattındaki CD44+/CD24- yüzey belirteç özelliğigösteren MKKH?ler akış sitometrisi ile izole edilmiştir. MCF10A, MCF-7 kanser hücre (KH) hattı ve buhattan izole edilen CD44+/CD24- yüzey belirteç özelliklerine sahip MKKH?'ler %0,9 NaCI içerisineresuspanse edildikten sonra FTIR spektrometre ile ölçülmüştür.Bulgular: MCF-7 içerisindeki CD44+/CD24- yüzey belirteç özelliğine sahip KKH?lerinin sort oranı%2,0-2,3 olarak belirlenmiştir. Elde edilen FTIR spektrumlarında, MKKH, meme kanser hücreleri (KH,non-KKH, bulk populasyon) ve sağlıklı hücreler arasında spektral benzerlikler ve farklılıklar tespitedilmiştir. MKKH?lerde lipit ve protein sinyalleri daha güçlü olup hücre zarı akışkanlığı ve dinamiğifazladır. Sağlıklı hücreler ile kıyaslandığında, KH?lerde ?-helikal proteinler ve DNA sinyallerindeazalmaya karşın negatif yüklü karboksil gruplarından kaynaklanan sinyallerde artış gözlenmektedir. Buveriler, MKKH?lerin, sağlıklı ve KH?lere kıyasla yapı, içerik ve dinamiği bakımından oldukça farklı birprofil sergilediğini göstermektedir.Sonuç: Bu çalışma, MKKH?lerinin moleküler yapısı ve içeriğindeki değişikliklerin incelemesi vasıtasıylaterapötik hedefli ilaç çalışmaları yapılabileceğini ortaya koymaktadır. FTIR spektroskopisi boyar maddegerektirmeden, hassas ve hızlı ölçüm alınması, örnek hazırlamada kolaylık ve az miktarda örnekgerektirmesi sebebiyle ileri hücre çalışmalarında ve medikal alanda biyolojik örneklerin analizlerindekullanılabileceği de gösterilmiştir.