Browsing by Author "Efe, Hande"

Now showing 1 - 2 of 2

Raw 264.7 Makrofaj Hücre Kültüründe Lipopolisakkarid ile Oluşturulan in Vitro Sepsis Modelinde Vareniklinin İnflamasyon ve Migrasyon Süreçleri Üzerine Alfa7 Nikotinik Asetilkolin Reseptörü Aracılı Etkileri
(2020) Arici, M. Aylin; Barış, Elif; Efe, Hande; Tosun, Metiner; Gümüştekin, Mukaddes
Vücutta oluşan sistemik bir inflamatuvar yanıt olan sepsiste gelişen inflamasyonun kontrolünde kolinerjik antiinflamatuvar yolak önemli bir işlev görmektedir. Çalışmamızda, fare RAW 264.7 makrofaj hücrelerinde lipopolisakkarit (LPS) ile oluşturulan in vitro inflamasyon modelinde bir alfa-7 nikotinik asetilkolin reseptör (?7nAChR) agonisti olan vareniklinin inflamatuvar sitokinler, hücre proliferasyonu ve migrasyonu üzerine etkileri araştırılmıştır. Makrofaj hücrelerine artan konsantrasyonlarda (0,1-0,5-0,8-1 µM) LPS uygulaması sonucunda 24 saatte değişen sitokin konsantrasyonuna göre etkin LPS dozu belirlenmiştir. Ardından, etkin LPS dozu kullanılarak artan konsantrasyonlarda vareniklinin (1-3-10-30 µM) 24 saat sonunda sitokin düzeylerini üzerine etkisi belirlenmiş ve deksametazonun etkisi ile karşılaştırılmıştır. Vareniklin varlığında nikotinik asetilkolin reseptörlerinin (nAChR) işlevi selektif olmayan nAChR antagonisti mekamilamin; ?7nAChR'lerin işlevi ise selektif ?7nAChR antagonisti metililkakonitin ile araştırılmıştır. Vareniklinin LPS ile uyarılan hücre proliferasyonu ve migrasyonuna olan etkisi gerçek zamanlı olarak incelenmiştir. LPS uygulamasından 24 saat sonra hücreler toplanmış ve ELISA ile IL-1ß, IL-6 ve TNF? seviyeleri belirlenmiştir. İlaç uygulamalarından 24 saat sonra gerçek zamanlı hücre proliferasyonu ve migrasyon testleri yapılmıştır. Vareniklin, konsantrasyona bağlı olarak (1-3-10-30 µM), deksametazon uygulamasına benzer şekilde, LPS uygulamasına bağlı 24 saat sonra artan IL-1ß, IL-6 ve TNF? düzeyleri azaltmıştır. Bulgularımız, vareniklinin LPS ile uyarılan IL-1ß, IL-6 ve TNF? düzeylerini çoğunlukla ?7nAChR aracılığı ile azaltığını düşündürmektedir. Ek olarak, vareniklin LPS kaynaklı hücre proliferasyonunu ve migrasyonunu inhibe etmektedir. Vareniklinin, antiproliferatif etkinliğinden farklı olarak, migrasyonu ?7nAChR aktivasyonu ile baskıladığı gözlenmektedir. Sonuç olarak bulgularımız, ?7nAChR agonisti vareniklinin kolinerjik antiinflamatuvar yolak üzerine etki ederek makrofaj proliferasyonu ve migrasyonunun yanı sıra sitokin salıverilişini de baskılayarak antiinflamatuvar etkinlik gösterdiğini düşündürmektedir.
Citation - WoS: 11
Citation - Scopus: 11
Varenicline Prevents Lps-Induced Inflammatory Response Via Nicotinic Acetylcholine Receptors in Raw 264.7 Macrophages
(Frontiers Media Sa, 2021) Baris, Elif; Efe, Hande; Gumustekin, Mukaddes; Arici, Mualla Aylin; Tosun, Metiner
The cholinergic anti-inflammatory pathway plays an important role in controlling inflammation. This study investigated the effects of varenicline, an alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor (alpha 7nAChR) agonist, on inflammatory cytokine levels, cell proliferation, and migration rates in a lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation model in RAW 264.7 murine macrophage cell lines. The cells were treated with increasing concentrations of varenicline, followed by LPS incubation for 24 h. Prior to receptor-mediated events, anti-inflammatory effects of varenicline on different cytokines and chemokines were investigated using a cytokine array. Nicotinic AChR-mediated effects of varenicline were investigated by using a non-selective nAChR antagonist mecamylamine hydrochloride and a selective alpha 7nAChR antagonist methyllycaconitine citrate. TNF alpha, IL-1 beta, and IL-6 levels were determined by the ELISA test in cell media 24 h after LPS administration and compared with those of dexamethasone. The rates of cellular proliferation and migration were monitored for 24 h after drug treatment using a real-time cell analysis system. Varenicline decreased LPS-induced cytokines and chemokines including TNF alpha, IL-6, and IL-1 beta via alpha 7nAChRs to a similar level that observed with dexamethasone. Varenicline treatment decreased LPS-induced cell proliferation, without any nAChR involvement. On the other hand, the LPS-induced cell migration rate decreased with varenicline via alpha 7nAChR. Our data suggest that varenicline inhibits LPS-induced inflammatory response by activating alpha 7nAChRs within the cholinergic anti-inflammatory pathway, reducing the cytokine levels and cell migration.